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有哪些方法可以提高ELISA實驗的重復性?

更新時間:2025-10-21  |  點擊率:599
  有哪些方法可以提高ELISA實驗的重復性?
 
  以下是提高ELISA實驗重復性的關鍵方法,天正信達結合操作優化和質控要點:
 
  一、標準化操作流程
 
  移液一致性‌
 
  使用校準后的多通道移液器,采用吸頭預潤濕技術減少氣泡,確保加樣體積和速度一致‌。
 
  洗板控制‌
 
  優先使用洗板機保證每孔洗滌均勻,手工洗板時需控制力度和時間,避免孔間污染‌。
 
  孵育條件‌
 
  覆蓋板蓋減少邊緣效應,確保孵育溫度和時間嚴格統一(如37℃±0.5℃)‌。
 
  二、試劑與樣本處理
 
  試劑平衡與保存‌
 
  所有試劑使用前需平衡至室溫,避免反復凍融,不同批次試劑不可混用‌。
 
  樣本制備‌
 
  避免溶血或高脂樣本,凍融樣本需充分混勻,渾濁樣本需離心后檢測‌。
 
  三、質控與驗證
 
  復孔檢測‌
 
  設置復孔計算平均值,批內CV應<10%,批間CV<15%‌。
 
  對照設置‌
 
  每板需包含陰陽性對照及標準曲線(R²≥0.99),異常值需排查操作誤差‌。
 
  四、環境與設備管理
 
  溫控校準‌
 
  維持環境溫度18-25℃,定期校準水浴箱和酶標儀‌。
 
  避免干擾‌
 
  顯色時避光操作,封板膜不可重復使用,邊緣孔可增加空白孔緩沖‌。
 
  通過上述措施可顯著降低CV值,提升實驗精密度‌。
 
  注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。 Elisa試劑盒
 
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