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ELISA實驗:酶聯免疫吸附測定原理

更新時間:2025-10-30  |  點擊率:173

  ELISA實驗:酶聯免疫吸附測定原理

  ELISA(酶聯免疫吸附測定)是一種基于抗原-抗體特異性結合的高靈敏度免疫檢測技術,通過酶催化顯色反應實現目標物質的定性或定量分析?。其核心原理如下:

  基本原理?

  固相包被?

  將抗原或抗體固定在聚苯乙烯微孔板等固相載體表面,保持其免疫活性?。

  酶標記結合?

  使用辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)標記抗體/抗原,形成酶標復合物,既保留免疫活性又具備酶催化能力?。

  顯色反應?

  加入底物(如TMB或PNPP)后,酶催化底物生成有色產物,顏色深淺與目標物濃度成正比,通過酶標儀測定吸光度值定量?。

  Elisa的檢測原理

  ELISA的定義和基本原理

  ELISA的三個核心步驟

  夾心法實驗流程

  ELISA的三種檢測類型

  ELISA的總結

  技術特點?

  高靈敏度?:檢測限可達皮克級(pg/mL)?。

  特異性強?:依賴抗原-抗體結合,單克隆抗體技術進一步提升了特異性?。

  方法多樣?:包括雙抗體夾心法(大分子)、競爭法(小分子)、間接法(抗體檢測)等?。

  應用場景?

  醫學診斷?:HIV、HBV等傳染病檢測,腫瘤標志物篩查?。

  科研領域?:細胞因子定量、藥物藥效評價?。

  食品安全?:獸藥殘留、過敏原檢測?。

  關鍵注意事項?

  加樣精度?:移液器需校準,避免氣泡或孔壁殘留導致誤差?。

  溫度控制?:試劑與樣本需平衡至室溫,減少動力學差異?。

  洗滌?:手工拍板需垂直操作,機器洗板需檢查沖洗頭通暢?。

  如需進一步了解實驗流程,可參考:ELISA操作視頻演示?。

  注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

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