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抗體常見問題之WB解決方案
2025-12-08
抗體常見問題之WB解決方案天津天正信達(dá)Elisa試劑盒1.條帶位置異常原因?:蛋白可能存在多種異構(gòu)體(如剪切體、二聚體)或翻譯后修飾(如糖基化、泛素化)?。重組蛋白與內(nèi)源蛋白的修飾差異也會(huì)導(dǎo)致偏移。解決?:查閱UniProt等數(shù)據(jù)庫確認(rèn)蛋白異構(gòu)體信息,或使用磷酸酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證修飾影響?。2.信號(hào)弱或無信號(hào)原因?:轉(zhuǎn)膜不充分、抗體濃度不足、樣本蛋白量低或封閉不干凈...
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ELISA試劑盒操作流程中哪些步驟最關(guān)鍵?
2025-12-08
ELISA試劑盒操作流程中哪些步驟最關(guān)鍵?天津天正信達(dá)Elisa試劑盒一、ELISA試劑盒操作流程及技術(shù)要點(diǎn)加樣細(xì)節(jié)?:使用專用加樣器,避免氣泡產(chǎn)生,槍頭不可觸及孔壁。不同試劑更換吸頭,防止交叉污染。加樣量需準(zhǔn)確,避免孔間不一致。孵育控制?:嚴(yán)格按說明書溫度(通常37℃)和時(shí)間(如1小時(shí))孵育,避免溫度波動(dòng)。孵育期間確保酶標(biāo)板平放,避免液體溢出。洗滌性?:洗...
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ELISA試劑盒常見問題及預(yù)防措施
2025-12-05
標(biāo)簽:ELISA試劑盒天正信達(dá)試劑盒生物試劑酶標(biāo)板吸頭標(biāo)準(zhǔn)品ELISA試劑盒常見問題及預(yù)防措施一、ELISA操作流程技術(shù)要點(diǎn)加樣細(xì)節(jié)?:使用專用加樣器,避免氣泡產(chǎn)生,槍頭不可觸及孔壁?。不同試劑更換吸頭,防止交叉污染?。加樣量需準(zhǔn)確,避免孔間不一致。孵育控制?:嚴(yán)格按說明書溫度(通常37℃)和時(shí)間(如1小時(shí))孵育,避免溫度波動(dòng)?。孵育期間確保酶標(biāo)板平放,避免...
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ELISA試劑盒操作流程及技術(shù)要點(diǎn)
2025-12-05
ELISA試劑盒操作流程及技術(shù)要點(diǎn)一、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備試劑解凍與平衡?:從冰箱取出試劑盒后,2-8℃解凍30分鐘,再室溫平衡30分鐘?。試劑配制?:標(biāo)準(zhǔn)品?:凍干標(biāo)準(zhǔn)品用稀釋液溶解后,按梯度稀釋(如2000→0pg/mL)?。洗滌液?:濃縮液按1:25稀釋,混勻后使用?。抗體工作液?:生物素化抗體按1:100稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用?。二、操作流程加樣與孵育?:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本...
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競爭法在ELISA中的兩種計(jì)算方法
2025-12-04
競爭法在ELISA中的兩種計(jì)算方法在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強(qiáng)度取決于反應(yīng)中酶結(jié)合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調(diào)節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時(shí)反應(yīng)比較敏感。競爭法ELISA不易用自視判斷結(jié)果,因肉眼很難辨別弱陽性反應(yīng)與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計(jì)測定,讀出S、P和N的吸光值。計(jì)算方法主要也有兩種,即陽性判...
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熒光定量PCR試劑盒在實(shí)驗(yàn)過程有哪些
2025-12-02
熒光定量PCR試劑盒在實(shí)驗(yàn)過程有哪些熒光定量PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)過程:一、試劑準(zhǔn)備1.DNA模板2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同...
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天正信達(dá)帶您了解4%組織細(xì)胞固定液產(chǎn)品說明
2025-12-01
天正信達(dá)帶您了解4%組織細(xì)胞固定液產(chǎn)品說明:多聚甲醛是免疫組織化學(xué)(IHC)和免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)研究中常用的固定劑之一。該固定劑較為溫和,能很好地保存組織的抗原性和細(xì)微結(jié)構(gòu),適于組織標(biāo)本和細(xì)胞片的較長期保存,非常適合組織和細(xì)胞的光鏡免疫化學(xué)研究。本產(chǎn)品為4%多聚甲醛的PBS溶液,可直接用于組織和細(xì)胞固定。若需使用其他低濃度多聚甲醛,可使用0.01MPBS...
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細(xì)胞凍存盒的知識(shí)點(diǎn)詳解
2025-12-01
細(xì)胞凍存盒的知識(shí)點(diǎn)詳解細(xì)胞凍存盒通過控制降溫速率保護(hù)細(xì)胞活性,避免冰晶形成導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。細(xì)胞凍存盒的核心功能與分類細(xì)胞凍存盒是用于實(shí)現(xiàn)程序性降溫(通常1℃/分鐘)的關(guān)鍵工具,通過控制降溫速度減少冰晶對細(xì)胞的損傷?45。主要分為兩類:?傳統(tǒng)異丙醇凍存盒?:需添加異丙醇作為導(dǎo)熱介質(zhì),存在泄漏風(fēng)險(xiǎn),需定期更換試劑?12。?無試劑凍存盒?:內(nèi)置特殊合金材料,無需異...
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多酚氧化酶(PPO)測試盒應(yīng)該怎么使用
2025-11-26
多酚氧化酶(PPO)測試盒應(yīng)該怎么使用多酚氧化酶(PPO)測試盒使用步驟試劑準(zhǔn)備?使用前將試劑充分混勻,按說明書準(zhǔn)確稀釋,避免濃度偏差?。若為微板法,需檢查微孔板是否完好,確保與試劑兼容?。樣品處理?植物樣本(如馬鈴薯)需低溫保存,避免酶活性損失?。稱取5g組織,加入緩沖液研磨成勻漿,離心后取上清液定容?。土壤樣本需按試劑盒要求預(yù)處理,避免引入抑制劑?。酶活...
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如何判斷ELISA實(shí)驗(yàn)中是否存在誤差?
2025-11-26
如何判斷ELISA實(shí)驗(yàn)中是否存在誤差?在ELISA實(shí)驗(yàn)中,判斷誤差的存在是確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵。誤差可能來源于實(shí)驗(yàn)操作的各個(gè)環(huán)節(jié),因此需要通過系統(tǒng)性的質(zhì)控措施來識(shí)別和評(píng)估。以下是判斷誤差的主要方法:1.?設(shè)置對照實(shí)驗(yàn)?對照實(shí)驗(yàn)是識(shí)別誤差的基礎(chǔ)。通過設(shè)置?陰性對照?(如空白孔或健康樣本)和?陽性對照?(已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品),可以驗(yàn)證試劑活性和實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)的穩(wěn)定性?。...
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移液器校準(zhǔn)指南:確保實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)加樣的關(guān)鍵步驟
2025-11-21
如何校準(zhǔn)移液器以確保加樣準(zhǔn)確性?移液器校準(zhǔn)方法校準(zhǔn)環(huán)境與工具?溫度控制在20-25℃,波動(dòng)≤±0.5℃。使用電子天平(精度0.1mg)和去離子水,天平內(nèi)放置蒸餾水維持濕度。操作步驟?將移液器調(diào)至待校準(zhǔn)體積,垂直吸取去離子水至小燒杯,記錄重量。誤差應(yīng)≤±1%(固定量程)或±2%(可調(diào)量程)。校準(zhǔn)頻率?常規(guī)實(shí)驗(yàn)每月校準(zhǔn)1...
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ELISA實(shí)驗(yàn)中常見的誤差來源有哪些?
2025-11-21
ELISA實(shí)驗(yàn)中常見的誤差來源有哪些?ELISA實(shí)驗(yàn)中常見的誤差來源可分為以下幾類,天正信達(dá)結(jié)合了實(shí)驗(yàn)操作、樣本處理及試劑環(huán)境等多方面因素:一、操作因素加樣誤差?:移液器未校準(zhǔn)、吸頭未潤洗或加樣時(shí)觸及孔壁,導(dǎo)致樣品體積不準(zhǔn)確或交叉污染?。孵育條件不當(dāng)?:溫度不穩(wěn)定、未覆蓋板膜導(dǎo)致液體蒸發(fā)、疊放多塊板子或孵育時(shí)間不足,均可能引起孔間濃度差異?。洗滌問題?:沖洗...
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ELISA試劑盒為何需要時(shí)刻保溫
2025-11-20
ELISA試劑盒為何需要時(shí)刻保溫在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反響的完結(jié)需求有一定的溫度和時(shí)刻,這一保溫進(jìn)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA試劑盒總是需要時(shí)刻保溫,主要因?yàn)镋LISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,參加板孔中的標(biāo)本,其間...
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緩沖溶液的配置及原理有哪些
2025-11-20
緩沖溶液的配置及原理有哪些緩沖溶液的緩沖原理具備緩沖作用的緩沖溶液,通常針對溶液中放入一定量的酸和堿,能夠起到防止溶液PH值產(chǎn)生一定變化的良好作用。一般來說,弱酸以及其鹽溶液混合而成的溶液、弱堿與其鹽溶液進(jìn)行混合的溶液等,都可以被稱為緩沖溶液。能夠產(chǎn)生對酸的緩沖作用,是由于其中的弱酸根離子的原因。如果向該溶液里面滴加定量的強(qiáng)酸物質(zhì),氫離子勢必要被弱酸根離子消...
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能詳細(xì)說說酶聯(lián)免疫吸附法的步驟嗎?
2025-11-19
能詳細(xì)說說酶聯(lián)免疫吸附法的步驟嗎?酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)是一種常用的免疫學(xué)檢測技術(shù),其核心步驟包括樣本處理、加樣、溫育、洗滌、顯色和結(jié)果測定等環(huán)節(jié)?。以下是基于常見雙抗體夾心法的詳細(xì)操作流程:1.?試劑準(zhǔn)備與樣本處理?標(biāo)準(zhǔn)品溶解?:將凍干標(biāo)準(zhǔn)品加入1mL通用稀釋液,靜置15分鐘溶解后,按說明書進(jìn)行倍比稀釋,配置梯度濃度工作液?。樣本稀釋?:根據(jù)樣本類型...